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領導給你一個項目，讓你自己去尋抗體對，你挺賣力的，一下子尋了5家，好嘛，突然就懵逼了，一下子10個抗體，怎么篩適合自己的呢？
比如做免疫層析，首先，你把每個廠家各自的配對抗體彼此按照標記和包被互調(diào)順序的方式進行測試(例：廠家1，A→B，B→A)，如果篩選到了大致符合你心里預期的，基本上也就確定廠家了；如果感覺都沒有符合預期的，只有兩種情況，一是你試劑研發(fā)的體系不合格；二是這10種配對方式確實都沒能符合預期。
從經(jīng)驗來看，市面上5家抗體都沒挑出來湊合用的幾乎不太可能，可能你的心理預期有點過高了，因為前期的篩選體系肯定不適用于全部的抗體對，我們秉承著矮子里面挑將軍的心態(tài)應該更好一些。如果真是出現(xiàn)了情況二這種的，10種配對都是不分伯仲的小矮子，也不要輕易對自己的工作產(chǎn)生質(zhì)疑，這時候有兩種情況可以選擇，一是繼續(xù)找新的廠家測試，二是抗體篩選從廠家自配對變成廠家互配對。如果是你，你會選擇哪種呀??？很多人可能會選擇第一種，因為對第二種的工作量望而卻步?？贵w互搭的話，10×10就是100種情況。減去之前測試的10種，那還要做90種互搭！對于免疫層析，90種互搭是一件很有工作量的事情，這么做應該是個傻子。然而，我就是那個傻子。
由于我有點強迫癥，所以我一般只相信事實，并不相信概率的問題，概率通常意味著遺漏。如果條件允許，我一般會選取3個國產(chǎn)廠家，1個國外廠家。一般我的測試上來就是全面鋪開的模式，直接就是8×8的棋盤測試。我不知道大家適不適應這種傻瓜式的操作，但是我還是挺推崇這種做法的，因為這讓我后續(xù)的實驗有底氣，底氣這種東西是能讓人少走彎路的。所以一般我培養(yǎng)實驗員，首先就是從不怕辛苦開始。我舉個例子，原來我接手某個項目，辭職的人一共留了11個廠家(22種)抗體，說是沒有篩選出能用的配對。如果按照22×22的配對模式，我要做484種測試，然而我真的就這么做了。每個抗體都包了板子，都標記了酶，像拉魚網(wǎng)一樣測試了2天，6塊酶標板，結果讓我生氣的是，這484種結果中，至少400種是可用的??。不過，收獲就是我的酶標記手藝得到了提升，也篩選到了非常好的組合，同時驗證了一件事，很大一部分的酶免篩選可以平行轉移到層析平臺。
還是講一下。原料這種東西，基本上每個克隆都是原廠家在成百上千個克隆里挑選出來效價比較高的，我們可以懷疑他們推薦的搭配方式，但盡量別斷定他們的抗體和抗原沒反應。試劑廠家的工作，就是從這些高親和力的抗體中再做出優(yōu)化，篩選出更加符合性能的配對，其實我們應該慶幸，原料廠家給我們做的前期工作已經(jīng)夠多了，就差幫我們OEM了。
另外就是怎么篩。對于靈敏度要求高的，就選檢出限附近的樣本和陰性樣本的信噪比來篩選；對于線性區(qū)間要求比較高的，可以再加上幾個線性高值點。還是那句話，前期的篩選期望值不要太高，否則很容易心煩意亂。
放平心態(tài)，做了想到的就好。實驗這種東西，做的時間長了就佛了，像是玄學，主打隨緣。
來源：IVDdiagnosis
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德國維潤賽潤（Institut VirionSerion GmbH）成立于1978年，是國際知名的診斷產(chǎn)業(yè)原料生產(chǎn)商和供應商。公司的研發(fā)和生產(chǎn)基地位于德國維爾茨堡，已通過DIN EN ISO 13485質(zhì)量體系認證，擁有三級生物安全實驗室(P3實驗室)。經(jīng)過了40余年的發(fā)展，公司構建了豐富的生物原料產(chǎn)品線，主要包括天然抗原、重組抗原、人源化單克隆抗體和磁珠等。
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